Dear Mark <br><br>I explain you what I  want to ask . I give you a detail of my processing -<br>* step for packing lipid around protein-<br>1. concatanation of protein and lipid bilayer in proper orientation- I did.<br>2.Inflate the bilayer by using inflategro script with scaling factor 4 and cutoff 14- I did .<br>
 there is 8 lipid removed in this process and a/c to that   I have update my topology file .<br>3. Energy minimisation by applying strong position restrain on protein the force constant=100000<br><br>problem occur here is-<br>
<br>Step=  344, Dmax= 1.8e-05 nm, Epot=  4.29315e+06 Fmax= 1.02525e+05, atom= 4615<br>Step=  349, Dmax= 1.4e-06 nm, Epot=  4.29315e+06 Fmax= 9.86524e+04, atom= 4615<br>Stepsize too small, or no change in energy.<br>Converged to machine precision,<br>
but not to the requested precision Fmax &lt; 1000<br><br>Double precision normally gives you higher accuracy.<br><br>writing lowest energy coordinates.<br><br>Steepest Descents converged to machine precision in 350 steps,<br>
but did not reach the requested Fmax &lt; 1000.<br>Potential Energy  =  4.2931510e+06<br>Maximum force     =  1.0252509e+05 on atom 4615<br>Norm of force     =  1.3668822e+03<br><br>my em.mdp file-<br>cpp                 =  /usr/bin/cpp<br>
define              =  -DPOSRES<br>constraints         =  none<br>integrator          =  steep<br>nsteps              =  10000<br>;<br>;       Energy minimizing stuff<br>;<br>emtol               =  1000<br>emstep              =  0.001 <br>
<br>nstcomm             =  1<br>ns_type             =  grid<br>rlist               =  1<br>rcoulomb            =  1.0<br>rvdw                =  1.0<br>Tcoupl              =  no<br>Pcoupl              =  no<br>gen_vel             =  no<br>
comm-mode           = Linear<br>pbc                 = XYZ<br><br>my topology file is like this-<br>; Include forcefield parameters<br>#include &quot;ffG53a6_lipid.itp&quot;<br><br>#include &quot;topol_A.itp&quot;<br>#ifdef POSRES<br>
#include &quot;posre_A.itp<br><br>#include &quot;topol_B.itp<br>#ifdef POSRES<br>#include &quot;posre_B.itp<br>#endif<br><br>; Include DMPC chain topology<br>#include &quot;dmpc.itp&quot;<br><br>[ system ]<br>; Name<br>Protein in DMPC bilayer<br>
<br>[ molecules ]<br>; Compound        #mols<br>Protein_A           1<br>Protein_B           1<br>DMPC               120<br><br>my question-<br>1. probable reason of steepest descent converged to macine precision  but did not reach the requested Fmax &lt; 1000.<br>
2.The even after applying strong position restrain on protein the protein structure being disturbed.<br><br>If u can make help for me . I will appreciate you.<br><br>Thanks<br>Nitu sharma<br><br>