Dear David, Thanks for the reply, guess i will do some literature survey and see if i can find some validated urea parameters.<br><br>karan<br><br><div class="gmail_quote">On Mon, Sep 21, 2009 at 8:51 PM, David van der Spoel <span dir="ltr">&lt;<a href="mailto:spoel@xray.bmc.uu.se">spoel@xray.bmc.uu.se</a>&gt;</span> wrote:<br>
<blockquote class="gmail_quote" style="border-left: 1px solid rgb(204, 204, 204); margin: 0pt 0pt 0pt 0.8ex; padding-left: 1ex;"><div class="im">karan syal wrote:<br>
<blockquote class="gmail_quote" style="border-left: 1px solid rgb(204, 204, 204); margin: 0pt 0pt 0pt 0.8ex; padding-left: 1ex;">
Dear Justin,<br>
<br>
Thanks for the reply!<br>
<br>
I will surely try minimize the protein in Vacuum and then try adding Urea again.<br>
<br>
Just that i was wondering how will that effect my artifact bonds which are between Urea and Water, and not at all between any Protein atom and Urea/Sol?? As i mentioned earlier, these bonds are formed only after minimization, they are not present before adding 10M urea+water box (No such bonds in its individual 10M urea+water .gro either ) to protein, they are neither there in the before minimized protein+10M urea+water system.<br>

<br>
</blockquote></div>
Don&#39;t use the Urea topology that is in the gromacs distribution. It is not based on any force field known to man.<br>
<blockquote class="gmail_quote" style="border-left: 1px solid rgb(204, 204, 204); margin: 0pt 0pt 0pt 0.8ex; padding-left: 1ex;">
<br>
Thanks again,<br>
<br>
cherrz<br>
karan<div><div></div><div class="h5"><br>
<br>
On Mon, Sep 21, 2009 at 4:11 PM, Justin A. Lemkul &lt;<a href="mailto:jalemkul@vt.edu" target="_blank">jalemkul@vt.edu</a> &lt;mailto:<a href="mailto:jalemkul@vt.edu" target="_blank">jalemkul@vt.edu</a>&gt;&gt; wrote:<br>

<br>
<br>
<br>
    karan syal wrote:<br>
<br>
        Dear Gromacs users,<br>
<br>
        I am trying to run a urea+protein simulation and encountering a<br>
        few problems at various stages.<br>
<br>
        I have taken an equilibrated 10M urea box of size<br>
        2.84nmx2.84nmx2.84nm (I started with 3x3x3 containing 160 urea +<br>
        398 SOL, ran NPT @ 1 bar and 300K)<br>
<br>
        I am using this equilibrated box to add to a globular protein of<br>
        about 250 residues using following commands :<br>
<br>
<br>
        editconf -f P48.gro -o P48_box.gro -c -d 0.6 -bt dodecahedron           (Giving me a dodecahedron with Vol = 407.98nm^3, so for this<br>
        volume, for 10M urea the number of urea above box should add is<br>
        2448.)<br>
<br>
        genbox -cp P48_box.gro -cs 10Murea.gro -o P48_10MUrea.gro          (*This adds 2064 Urea only, shouldnt it be adding 2448 urea<br>
        molecules, corresponding to 10M urea box i have solvated with??)*<br>
<br>
<br>
    No, it shouldn&#39;t.  The protein occupies space within that volume, as<br>
    well.<br>
<br>
<br>
<br>
        When i try to minimize this using the following em.mdp<br>
<br>
<br>
        cpp                 =  /usr/bin/cpp<br>
        constraints         =  none<br>
        integrator          =  steep<br>
        nsteps              =  5000<br>
        coulombtype = PME<br>
        pme_order = 4<br>
        nstlist = 5<br>
        ns_type = grid<br>
        rlist               =  1.0<br>
        rcoulomb            =  1.0<br>
        rvdw                =  1.0<br>
        Tcoupl              =  no<br>
        Pcoupl              =  no<br>
        fourierspacing = 0.12<br>
        fourier_nx = 0<br>
        fourier_ny = 0<br>
        fourier_nz = 0<br>
        ;       Energy minimizing stuff<br>
        ;<br>
        emtol               =  100<br>
        emstep              =  0.01<br>
<br>
<br>
        *It gives me the following output*<br>
<br>
<br>
        Steepest Descents:<br>
          Tolerance (Fmax)   =  1.00000e+02<br>
          Number of steps    =         5000<br>
        Warning: 1-4 interaction between 2796 and 2801 at distance 2.727<br>
        which is larger than the 1-4 table size 2.000 nm<br>
        These are ignored for the rest of the simulation<br>
        This usually means your system is exploding,<br>
        if not, you should increase table-extension in your mdp file<br>
        or with user tables increase the table size<br>
<br>
        t = 0.015 ps: Water molecule starting at atom 34477 can not be<br>
        settled.<br>
        Check for bad contacts and/or reduce the timestep.<br>
        Wrote pdb files with previous and current coordinates<br>
<br>
        Stepsize too small, or no change in energy.<br>
        Converged to machine precision,<br>
        but not to the requested precision Fmax &lt; 100<br>
<br>
        Double precision normally gives you higher accuracy.<br>
        You might need to increase your constraint accuracy, or turn<br>
        off constraints alltogether (set constraints = none in mdp file)<br>
<br>
        writing lowest energy coordinates.<br>
<br>
        Steepest Descents converged to machine precision in 34 steps,<br>
        but did not reach the requested Fmax &lt; 100.<br>
        Potential Energy  = -1.3092671e+22<br>
        Maximum force     =            inf on atom 12598<br>
        Norm of force     =            inf<br>
<br>
        gcq#160: &quot;The Microsecond is Within Reach&quot; (P.J. Van Maaren)<br>
<br>
<br>
<br>
        /When i look at the file in VMD, the protein is completely out<br>
        of the box + There are unusual bonds between a lot of UREA and<br>
        SOL molecules/. ( The unusual bonds are artifcats after<br>
        minimization which are not there when i initially look at my<br>
        P48_10Mrea.gro, that is the gro generated after genbox wth -cs<br>
        as 10M urea)<br>
<br>
<br>
    &quot;Out of the box&quot; doesn&#39;t exist for a periodic system.  The &quot;bonds&quot;<br>
    you see are also *not* generated by Gromacs, but are also just an<br>
    artefact of visualization.  Bonds are not created or broken in<br>
    molecular mechanics.<br>
<br>
<br>
        I tried constraining hbonds as well in em.mdp bit to no effect.<br>
<br>
<br>
        I used the above em.gro to run a production run, with following<br>
        pr.mdp<br>
<br>
<br>
    Don&#39;t, it&#39;s a waste of time.  Never just plow ahead when something<br>
    isn&#39;t working.  There is something unreasonable about the starting<br>
    structure.  Try minimizing the protein in vacuo first, then add your<br>
    urea and try EM again.<br>
<br>
    -Justin<br>
<br>
    --     ========================================<br>
<br>
    Justin A. Lemkul<br>
    Ph.D. Candidate<br>
    ICTAS Doctoral Scholar<br>
    Department of Biochemistry<br>
    Virginia Tech<br>
    Blacksburg, VA<br></div></div>
    jalemkul[at]<a href="http://vt.edu" target="_blank">vt.edu</a> &lt;<a href="http://vt.edu" target="_blank">http://vt.edu</a>&gt; | (540) 231-9080<div class="im"><br>
    <a href="http://www.bevanlab.biochem.vt.edu/Pages/Personal/justin" target="_blank">http://www.bevanlab.biochem.vt.edu/Pages/Personal/justin</a><br>
<br>
    ========================================<br>
    _______________________________________________<br>
    gmx-users mailing list    <a href="mailto:gmx-users@gromacs.org" target="_blank">gmx-users@gromacs.org</a><br></div>
    &lt;mailto:<a href="mailto:gmx-users@gromacs.org" target="_blank">gmx-users@gromacs.org</a>&gt;<div class="im"><br>
    <a href="http://lists.gromacs.org/mailman/listinfo/gmx-users" target="_blank">http://lists.gromacs.org/mailman/listinfo/gmx-users</a><br>
    Please search the archive at <a href="http://www.gromacs.org/search" target="_blank">http://www.gromacs.org/search</a> before<br>
    posting!<br>
    Please don&#39;t post (un)subscribe requests to the list. Use the www<br>
    interface or send it to <a href="mailto:gmx-users-request@gromacs.org" target="_blank">gmx-users-request@gromacs.org</a><br></div>
    &lt;mailto:<a href="mailto:gmx-users-request@gromacs.org" target="_blank">gmx-users-request@gromacs.org</a>&gt;.<div class="im"><br>
    Can&#39;t post? Read <a href="http://www.gromacs.org/mailing_lists/users.php" target="_blank">http://www.gromacs.org/mailing_lists/users.php</a><br>
<br>
<br>
<br></div>
------------------------------------------------------------------------<div class="im"><br>
<br>
_______________________________________________<br>
gmx-users mailing list    <a href="mailto:gmx-users@gromacs.org" target="_blank">gmx-users@gromacs.org</a><br>
<a href="http://lists.gromacs.org/mailman/listinfo/gmx-users" target="_blank">http://lists.gromacs.org/mailman/listinfo/gmx-users</a><br>
Please search the archive at <a href="http://www.gromacs.org/search" target="_blank">http://www.gromacs.org/search</a> before posting!<br>
Please don&#39;t post (un)subscribe requests to the list. Use the www interface or send it to <a href="mailto:gmx-users-request@gromacs.org" target="_blank">gmx-users-request@gromacs.org</a>.<br>
Can&#39;t post? Read <a href="http://www.gromacs.org/mailing_lists/users.php" target="_blank">http://www.gromacs.org/mailing_lists/users.php</a><br>
</div></blockquote><font color="#888888">
<br>
<br>
-- <br>
David van der Spoel, Ph.D., Professor of Biology<br>
Molec. Biophys. group, Dept. of Cell &amp; Molec. Biol., Uppsala University.<br>
Box 596, 75124 Uppsala, Sweden. Phone:  +46184714205. Fax: +4618511755.<br>
<a href="mailto:spoel@xray.bmc.uu.se" target="_blank">spoel@xray.bmc.uu.se</a>    <a href="mailto:spoel@gromacs.org" target="_blank">spoel@gromacs.org</a>   <a href="http://folding.bmc.uu.se" target="_blank">http://folding.bmc.uu.se</a></font><div>
<div></div><div class="h5"><br>
_______________________________________________<br>
gmx-users mailing list    <a href="mailto:gmx-users@gromacs.org" target="_blank">gmx-users@gromacs.org</a><br>
<a href="http://lists.gromacs.org/mailman/listinfo/gmx-users" target="_blank">http://lists.gromacs.org/mailman/listinfo/gmx-users</a><br>
Please search the archive at <a href="http://www.gromacs.org/search" target="_blank">http://www.gromacs.org/search</a> before posting!<br>
Please don&#39;t post (un)subscribe requests to the list. Use the www interface or send it to <a href="mailto:gmx-users-request@gromacs.org" target="_blank">gmx-users-request@gromacs.org</a>.<br>
Can&#39;t post? Read <a href="http://www.gromacs.org/mailing_lists/users.php" target="_blank">http://www.gromacs.org/mailing_lists/users.php</a><br>
</div></div></blockquote></div><br>