<html>
<head>
<style><!--
.hmmessage P
{
margin:0px;
padding:0px
}
body.hmmessage
{
font-size: 10pt;
font-family:Verdana
}
--></style>
</head>
<body class='hmmessage'>
<meta http-equiv="content-type" content="text/html; charset=utf-8">Dear all and Justin,<div>&nbsp;</div><div>I have try with the KALP-15 in DPPC tutorials..it was&nbsp;successfully&nbsp;done until Inflategro step.</div><div>then I tried with my own protein, I still having the same problems, while i wanna do the energy minimization after inflategro.</div><div><br></div><div>3 DPPC removed during inflategro...and i updated the number of molecules of DPPC lipid in topology..</div><div><br></div><div><br></div><div>here is how the strong_posre.itp file look like</div><div><div><br></div><div>&nbsp;[ position_restraints ]<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;; i funct fcx fcy fcz<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;1 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;2 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;3 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;4 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;5 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;.....<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;....<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;....<br style="text-indent: 0in !important; ">3483 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">3484 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">3485 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">3486 1 100000 100000 100000</div><div><br></div><div>ONLY protein included in the strong_posre.itp file....(this protein has 3486 atoms..)</div><div><br></div><div>then again i updated my topology...</div><div><br></div><div><br></div><div><div>; Include forcefield parameters</div><div>#include "ffG53a6_lipid.itp"</div><div><br></div><div><br></div><div>; Include Position restraint file</div><div>#ifdef POSRES</div><div>#include "posre.itp"</div><div>#endif</div><div><br></div><div>; Strong position restraints for InflateGRO</div><div>#ifdef STRONG_POSRES</div><div>#include "strong_posre.itp"</div><div>#endif</div><div><br></div><div>; Include DPPC chain topology</div><div>#include "dppc.itp"</div><div><br></div><div>; Include chain topologies</div><div>#include "topol_A.itp"</div><div>#include "topol_B.itp"</div><div><br></div><div>; Include water topology</div><div>#include "spc.itp"</div><div><br></div><div><br></div><div>#ifdef POSRES_WATER</div><div>; Position restraint for each water oxygen</div><div>[ position_restraints ]</div><div>; &nbsp;i funct &nbsp; &nbsp; &nbsp; fcx &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;fcy &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;fcz</div><div>&nbsp;&nbsp; 1 &nbsp; &nbsp;1 &nbsp; &nbsp; &nbsp; 1000 &nbsp; &nbsp; &nbsp; 1000 &nbsp; &nbsp; &nbsp; 1000</div><div>#endif</div><div><br></div><div>; Include generic topology for ions</div><div>#include "ions.itp"</div><div><br></div><div>[ system ]</div><div>; Name</div><div>protein in dppc</div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div>[ molecules ]</div><div>; Compound &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;#mols</div><div>Protein_A &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 1</div><div>Protein_B &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 1</div><div>DPPC &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; 125</div></div><div><br></div><div><br></div><div><meta http-equiv="content-type" content="text/html; charset=utf-8">&nbsp;and I also add in the "define" line in the energyminimization.mdp file<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;here is my em.mdp file&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;define =-DSTRONG_POSRES<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;integrator = steep<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;nsteps = 200<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;constraints = none<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;emtol = 1000.0<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;nstcgsteep = 10 ; do a steep every 10 steps of cg<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;emstep = 0.01 ; used with steep<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;nstcomm = 1<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;coulombtype = PME<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;ns_type = grid<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;rlist = 1.0<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;rcoulomb = 1.0<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;rvdw = 1.4<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;Tcoupl = no<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;Pcoupl = no<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;gen_vel = no<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;nstxout = 0 ; write coords every # step<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;optimize_fft = yes<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;HOWEVER, I still get this error when I proceed to the grompp step.</div><div><br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;Fatal error:<br style="text-indent: 0in !important; ">Syntax error - File strong_posre.itp, line 3<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;Last line read:<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;'[ position_restraints ]'<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;Invalid order for directive position_restraints<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;</div><div><br></div><div>as Justin commented, only Protein is selected in strong posre, ( yea..i only selected the protein)</div><div><br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;Can anyone guide me in this?<br style="text-indent: 0in !important; ">&nbsp;Yr comments and advices are appreciated.</div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div>edmund lee wrote:<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; Dear Justin and all..<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; I have been struggled for the pass few weeks...<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; I follow the KALP-15 in DPPC tutorials but I am using my own protein&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; instead.<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; I had successfully reached the step INFLATEGRO where 2 lipid removed&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; from the upper layer n 2 lipids removed from the lower layer. Then i&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; updated my topology with deducted 4 number of molecule of lipid.<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; then I generated the strong_porse.itp using the following command:<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; genrestr -f 1_newbox.gro -o strong_posre.itp -fc 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; here is how the strong_posre.itp file look like<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; [ position_restraints ]<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; ; i funct fcx fcy fcz<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; 1 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; 2 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; 3 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; 4 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; 5 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; .....<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; ....<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; ....<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; ...<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; 3483 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; 3484 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; 3485 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; 3486 1 100000 100000 100000<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; then i updated the topology (as shown below)<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; ; Include Position restraint file<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; #ifdef POSRES<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; #include "posre.itp"<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; #endif<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; ; Strong position restraints for InflateGRO<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; #ifdef STRONG_POSRES<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; #include "strong_posre.itp"<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; #endif<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; ; Include DPPC chain topology<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; #include "dppc.itp"<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; ; Include water topology<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; #include "spc.itp"<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; ; System specifications<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; [ system ]<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; 128-Lipid DPPC Bilayer&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; [ molecules ]<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; ; molecule name nr.<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; DPP 124<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; SOL 3655<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; and I also add in the "define" line in the energyminimization.mdp file<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; here is my em.mdp file&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; define =-DSTRONG_POSRES<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; integrator = steep<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; nsteps = 200<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; constraints = none<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; emtol = 1000.0<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; nstcgsteep = 10 ; do a steep every 10 steps of cg<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; emstep = 0.01 ; used with steep<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; nstcomm = 1<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; coulombtype = PME<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; ns_type = grid<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; rlist = 1.0<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; rcoulomb = 1.0<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; rvdw = 1.4<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; Tcoupl = no<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; Pcoupl = no<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; gen_vel = no<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; nstxout = 0 ; write coords every # step<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; optimize_fft = yes<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; HOWEVER, I get this error when I proceed to the grompp step.<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; Fatal error:<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; Syntax error - File strong_posre.itp, line 3<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; Last line read:<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; '[ position_restraints ]'<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; Invalid order for directive position_restraints<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; Can anyone guide me in this?<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; Yr comments and advices are appreciated.<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; You have several problems:<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; 1. Your [molecules] directive makes no reference to the protein that should be&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; present.<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; 2. Your "strong_posre.itp" file looks like it refers to the whole system; it&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; should have been created from the protein only. You don't want to restrain&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; everything in the system, anyway, and position restraints cannot be applied to a&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; multiple molecule types in a single [position_restraints] directive.<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; -Justin<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; best regards<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt; edmund<br style="text-indent: 0in !important; ">&gt; &gt;&nbsp;<div><br></div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div><br></div><div><br></div></div></div>                                               <br /><hr />Your E-mail and More On-the-Go. Get Windows Live Hotmail Free. <a href='https://signup.live.com/signup.aspx?id=60969' target='_new'>Sign up now.</a></body>
</html>