<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Strict//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-strict.dtd">

<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml">
  <head>
    <meta content="text/html; charset=UTF-8" http-equiv="Content-Type" />
    <title></title>
  </head>

  <body>
    <p style="margin: 0px;">Downloaded a pdb from pdb.org (1HNX) and stripped the PCY ligand and plugged it into pdb2gmx using AMBER03 and TIP3P (GROMACS 4.5). Ran through the rest of my process and I am having some issues.</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">Here is my flow of commands:</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">pdb2gmx -f &quot;$base&quot;.pdb -o &quot;$base&quot;.gro -p &quot;$base&quot;.top</p>

    <p style="margin: 0px;">I use AMBER03 and TIP3P</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">editconf -bt cubic -f &quot;$base&quot;.gro -o &quot;$base&quot;.gro -c -d 1.5</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">genbox -cp &quot;$base&quot;.gro -cs spc216.gro -o &quot;$base&quot;_b4ion.gro -p &quot;$base&quot;.top<br />
    <br />
    grompp -f em.mdp -c &quot;$base&quot;_b4ion.gro -p &quot;$base&quot;.top -o &quot;$base&quot;_b4ion.tpr<br />
    <br />
    genion -s &quot;$base&quot;_b4ion.tpr -o &quot;$base&quot;_b4em.gro -neutral -conc 0.001 -pname NA -nname CL -g &quot;$base&quot;_ion.log -p &quot;$base&quot;.top</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">Here I have some issues too, but it is intermittent. I have a charge of -563 but genion wants to add 580+ NA and one if any CL giving me a possitive charge in the system. My thought is that -neutral would give me a neutral system?</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">grompp -f em.mdp -c &quot;$base&quot;_b4em.gro -p &quot;$base&quot;.top -o &quot;$base&quot;_em.tpr</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">mdrun -v -s &quot;$base&quot;_em.tpr -c &quot;$base&quot;_after_em.gro -g emlog.log</p>

    <p style="margin: 0px;">I have set this up to be very thorough and it can run for 1000+ steps. My problem is it never gives me a good Fmax. I am always above 1e-4.</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;"><br />
    grompp -f pr.mdp -c &quot;$base&quot;_after_em.gro -p &quot;$base&quot;.top -o &quot;$base&quot;_pr.tpr<br />
    <br />
    mdrun -v -s &quot;$base&quot;_pr.tpr -o &quot;$base&quot;_pr.trr -e pr.edr -c &quot;$base&quot;_after_pr.gro -g prlog.log -cpi state_pr.cpt -cpo state_pr.cpt</p>

    <p style="margin: 0px;">This is where I always fail. First I get pressure errors and LINCS errors. I don&#39;t know how to minimize my system any farther, and therefor continue my jobs.</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">grompp -f md.mdp -c &quot;$base&quot;_after_pr.gro -p &quot;$base&quot;.top -o &quot;$base&quot;_md.tpr<br />
    <br />
    mdrun -v -s &quot;$base&quot;_md.tpr -o &quot;$base&quot;_md.trr -c &quot;$base&quot;_after_pr.gro -g md.log -e md.edr -cpi state_md.cpt -cpo state_md.cpt</p>

    <p style="margin: 0px;">I NEVER get to here....</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">I have stripped the MG and ZN. I have removed a significant portion of the protein/rna to limit its size. I have ran it at 1 fs, 2 fs, 4 fs. I have ran it with -heavyh. And I have tried every AMBER force field available in GROMACS 4.5.</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;">Any help would be much appreciated.</p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="margin: 0px;"><span></span></p>

    <p style="margin: 0px;">&#160;</p>

    <p style="font-family: monospace; white-space: nowrap; margin: 5px 0px 5px 0px;">TJ Mustard<br />
    Email: mustardt@onid.orst.edu</p>
  </body>
</html>