<div dir="ltr">Hi Justin,<br><br>Here is my complete code for umbrella sampling<br><br>title       = Umbrella pulling simulation <br>define      = -DPOSRES_2<br><br>integrator  = md<br>dt          = 0.002<br>tinit       = 0<br>

nsteps      = 2500000   ; 5 ns <br>nstcomm     = 10<br>nstxout     = 50000     ; every 100 ps<br>nstvout     = 50000 <br>nstfout     = 5000<br>nstxtcout   = 5000      ; every 10 ps<br>nstenergy   = 5000<br><br>constraint_algorithm    = lincs<br>

constraints             = all-bonds<br>continuation            = yes<br><br>nstlist     = 5<br>ns_type     = grid <br>rlist       = 1.4<br>rcoulomb    = 1.4<br>rvdw        = 1.4<br><br>; PME electrostatics parameters<br>
coulombtype     = PME<br>
fourierspacing  = 0.12<br>fourier_nx      = 0<br>fourier_ny      = 0<br>fourier_nz      = 0<br>pme_order       = 4<br>ewald_rtol      = 1e-5<br>optimize_fft    = yes<br><br>; Berendsen temperature coupling is on in two groups<br>

Tcoupl      = V-rescale<br>tc_grps     = Protein   SOL<br>tau_t       = 0.5       0.5<br>ref_t       = 300       300<br><br>; Pressure coupling is on<br>Pcoupl          = Parrinello-Rahman <br>pcoupltype      = isotropic<br>

tau_p           = 1.0       <br>compressibility = 4.5e-5<br>ref_p           = 1.0<br><br>; Generate velocities is off<br>gen_vel     = no <br><br>; Periodic boundary conditions are on in all directions<br>pbc     = xyz<br>

<br>; Long-range dispersion correction<br>DispCorr    = EnerPres<br><br>; Pull code<br>pull            = umbrella<br>pull_geometry   = distance<br>pull_dim        = N N Y<br>pull_start      = yes <br>pull_ngroups    = 1<br>

pull_group0     = Chain_B <br>pull_group1     = Chain_A <br>pull_init1      = 0<br>pull_rate1      = 0.0<br>pull_k1         = 1000    <br>pull_nstxout    = 1000     <br>pull_nstfout    = 1000   <br><br><br>I will do this umbrella sampling for 10ns, <br>

Do you think the COM distance can converge after long simulation time? ie back to the restraint position.<br><br>Regards,<br>Vijay.<br><br><br><br><div class="gmail_quote"><blockquote class="gmail_quote" style="margin:0 0 0 .8ex;border-left:1px #ccc solid;padding-left:1ex;">


<br>
Vijayaraj wrote:<br>
&gt; Hello,<br>
&gt;<br>
&gt; I am doing umbrella sampling to calculate PMF curve for the detachment<br>
&gt; of a terminal cyclic peptide with 8 aa&#39;s (CP) from the self-assembled<br>
&gt; cyclic peptide nanotube. I extracted the reaction coordinates staring<br>
&gt; from 5.5 ang COM distance between the terminal CP and the 2nd CP to 17.5<br>
&gt; ang, I did umbrella sampling on 25 configurations (for 5ns) and the<br>
&gt; window size is 0.5 ang. I used the following pulling code for umbrella<br>
&gt; sampling,<br>
&gt;<br>
&gt; pull            = umbrella<br>
&gt; pull_geometry   = distance<br>
&gt; pull_dim        = N N Y<br>
&gt; pull_start      = yes<br>
&gt; pull_ngroups    = 1<br>
&gt; pull_group0     = Chain_B<br>
&gt; pull_group1     = Chain_A<br>
&gt; pull_init1      = 0<br>
&gt; pull_rate1      = 0.0<br>
&gt; pull_k1         = 1000<br>
&gt; pull_nstxout    = 1000<br>
&gt; pull_nstfout    = 1000<br>
&gt;<br>
&gt;<br>
&gt; I restrained the 2nd CP unit and the pull_rate1 is 0, so the COM<br>
&gt; distance between the chain_A (terminal) and chain_B (2nd CP) should be<br>
&gt; restrained. after 5ns of umbrella sampling, I calculated the COM<br>
&gt; distance between chain A and B, but it was not restrained, for the 5.5<br>
&gt; ang COM distance restrain, the COM distance varies from 4.5 to 5.5 ang.<br>
&gt; and also the pulling cyclic peptide undergoes large conformational<br>
&gt; sampling. from the WHAM analysis I understood the sampling window is<br>
&gt; poorly represented. In addition to COM distance restrain, can I restrain<br>
&gt; the pulling CP&#39;s backbone atoms? so that the pulling groups large<br>
&gt; conformational sampling will be reduced.<br>
<br>
You could implement dihedral restraints to fix the backbone secondary structure,<br>
but I can&#39;t comment on the stability of trying to use these restraints in<br>
addition to the pull code.  Seems like a lot going on at once, to me.<br>
<br>
Also consider the fact that 5 ns is an extremely short timeframe to gather<br>
meaningful data.  Perhaps you just need more time in each window to equilibrate.<br>
  At the shortest COM distance, your two molecules are still likely experiencing<br>
some interactions, and it may require a great deal of sampling in this window to<br>
converge the simulations.  You haven&#39;t shown the rest of your .mdp file (always<br>
a good idea!), so we can only guess at whether or not your other settings should<br>
lead to a sensible result.<br>
<br>
-Justin<br>
<br>
--<br>
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Justin A. Lemkul<br>
Ph.D. Candidate<br>
ICTAS Doctoral Scholar<br>
MILES-IGERT Trainee<br>
Department of Biochemistry<br>
Virginia Tech<br>
Blacksburg, VA<br>
jalemkul[at]<a href="http://vt.edu" target="_blank">vt.edu</a> | (540) 231-9080<br>
<a href="http://www.bevanlab.biochem.vt.edu/Pages/Personal/justin" target="_blank">http://www.bevanlab.biochem.vt.edu/Pages/Personal/justin</a><br>
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</blockquote></div><br></div>