<html><body><div style="color:#000; background-color:#fff; font-family:times new roman, new york, times, serif;font-size:12pt"><div><span>Hi Justin,</span></div><div><span>If you observe my pulling simulation, you will see that the distances are (increasing) in the negative. <br></span></div><div><span><br></span></div><div><span>Here is the PMF (image):<br></span></div><div><span>http://www.flickr.com/photos/nahrenmascarenhas/6312990056/</span></div><div><span>this is not one expects in ligand unbinding. (of course these are from my initial simulations, approx. 1 ns runs in 5 windows)<br></span></div><div><br><span></span></div><div><span>Best,</span></div><div><span>nahren<br></span></div><div><br></div><div style="font-family: times new roman,new york,times,serif; font-size: 12pt;"><div style="font-family: times new roman,new york,times,serif; font-size: 12pt;"><font face="Arial" size="2"><hr size="1"><b><span style="font-weight:
 bold;">From:</span></b> Justin A. Lemkul &lt;jalemkul@vt.edu&gt;<br><b><span style="font-weight: bold;">To:</span></b> nahren manuel &lt;meetnahren@yahoo.com&gt;; Discussion list for GROMACS users &lt;gmx-users@gromacs.org&gt;<br><b><span style="font-weight: bold;">Sent:</span></b> Friday, November 4, 2011 7:44 PM<br><b><span style="font-weight: bold;">Subject:</span></b> Re: [gmx-users] PMF when pulling in -Z direction<br></font><br><br><br>nahren manuel wrote:<br>&gt; Dear Gromacs Users,<br>&gt; <br>&gt; I am trying to study ligand unbinding adopting Umbrella sampling (using Gmx 4.5.3). during my initial pull to generate configurations for umbrella windows I have pulled in the -Z direction,<br>&gt; @ s0 legend "0 Z"<br>&gt; @ s1 legend "1 dZ"<br>&gt; 0.0000&nbsp; &nbsp; 7.37361&nbsp; &nbsp; -0.33625<br>&gt; 0.0200&nbsp; &nbsp; 7.37377&nbsp; &nbsp; -0.33631<br>&gt; 0.0400&nbsp; &nbsp; 7.37404&nbsp; &nbsp; -0.33637<br>&gt; 0.0600&nbsp; &nbsp;
 7.3744&nbsp; &nbsp; -0.33643<br>&gt; 0.0800&nbsp; &nbsp; 7.37473&nbsp; &nbsp; -0.33649<br>&gt; .<br>&gt; .<br>&gt; .<br>&gt; .<br>&gt; 321.0800&nbsp; &nbsp; 7.37523&nbsp; &nbsp; -1.29949<br>&gt; 321.1000&nbsp; &nbsp; 7.37442&nbsp; &nbsp; -1.29955<br>&gt; 321.1200&nbsp; &nbsp; 7.37374&nbsp; &nbsp; -1.29961<br>&gt; 321.1400&nbsp; &nbsp; 7.37355&nbsp; &nbsp; -1.29967<br>&gt; 321.1600&nbsp; &nbsp; 7.37404&nbsp; &nbsp; -1.29973<br>&gt; 321.1800&nbsp; &nbsp; 7.37491&nbsp; &nbsp; -1.29979<br>&gt; 321.2000&nbsp; &nbsp; 7.3757&nbsp; &nbsp; -1.29985<br>&gt; 321.2200&nbsp; &nbsp; 7.37608&nbsp; &nbsp; -1.29991<br>&gt; 321.2400&nbsp; &nbsp; 7.37595&nbsp; &nbsp; -1.29997<br>&gt; 321.2600&nbsp; &nbsp; 7.37518&nbsp; &nbsp; -1.30003<br>&gt; 321.2800&nbsp; &nbsp; 7.37395&nbsp; &nbsp; -1.30009<br>&gt; .<br>&gt; .<br>&gt; .(so on)<br>&gt; <br>&gt; Now when I ran simulations in each umbrella windows, the PMF energies are in negative.&nbsp; My guess is that this is due to my
 initial setup, or is there something seriously wrong. And if i am right I should get the correct PMF by taking the negative of this PMF (or is it)??<br><br>So your PMF is negative, why is that a problem?&nbsp; A negative binding energy indicates favorability of binding.<br><br>-Justin<br><br>&gt; -----<br>&gt; ; Pull code&nbsp; (pulling simulation)<br>&gt; pull&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; = constraint<br>&gt; pull_geometry&nbsp;  = distance&nbsp; &nbsp;  pull_dim&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; = N N Y<br>&gt; pull_start&nbsp; &nbsp; &nbsp; = yes&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;  pull_ngroups&nbsp; &nbsp; = 1<br>&gt; pull_group0&nbsp; &nbsp;  = Protein<br>&gt; pull_group1&nbsp; &nbsp;  = MAL<br>&gt; pull_rate1&nbsp; &nbsp; &nbsp; = 0.005&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; ;<br>&gt; pull_k1&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;  = 1000&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; ; kJ mol^-1 nm^-2<br>&gt; pull_nstxout&nbsp; &nbsp; = 500&nbsp; &nbsp; &nbsp; ; every 1
 ps<br>&gt; pull_nstfout&nbsp; &nbsp; = 500&nbsp; &nbsp; &nbsp; ; every 1 ps<br>&gt; <br>&gt; -----<br>&gt; <br>&gt; ; Pull code&nbsp; (Umbrella simulation)<br>&gt; pull&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; = umbrella<br>&gt; pull_geometry&nbsp;  = distance&nbsp; &nbsp; &nbsp; ;<br>&gt; pull_dim&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; = Y Y Y<br>&gt; pull_start&nbsp; &nbsp; &nbsp; = yes&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;  ;<br>&gt; pull_ngroups&nbsp; &nbsp; = 1<br>&gt; pull_group0&nbsp; &nbsp;  = Protein<br>&gt; pull_group1&nbsp; &nbsp;  = MAL<br>&gt; pull_rate1&nbsp; &nbsp; &nbsp; = 0.000&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; ;<br>&gt; pull_k1&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp;  = 1000&nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; &nbsp; ; kJ mol^-1 nm^-2<br>&gt; pull_nstxout&nbsp; &nbsp; = 500&nbsp; &nbsp; &nbsp; ; every 1 ps<br>&gt; pull_nstfout&nbsp; &nbsp; = 500&nbsp; &nbsp; &nbsp; ; every 1 ps<br>&gt; <br>&gt; <br>&gt; Best,<br>&gt; nahren<br>&gt; <br>&gt; <br>&gt; <br>&gt; <br>&gt;
 <br>&gt; <br><br>-- ========================================<br><br>Justin A. Lemkul<br>Ph.D. Candidate<br>ICTAS Doctoral Scholar<br>MILES-IGERT Trainee<br>Department of Biochemistry<br>Virginia Tech<br>Blacksburg, VA<br>jalemkul[at]vt.edu | (540) 231-9080<br><a href="http://www.bevanlab.biochem.vt.edu/Pages/Personal/justin" target="_blank">http://www.bevanlab.biochem.vt.edu/Pages/Personal/justin</a><br><br>========================================<br><br><br></div></div></div></body></html>